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更新時間:2026-06-03
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在細胞實驗室日常培養(yǎng)中,支原體是最難察覺、污染率最高的污染源,整體細胞培養(yǎng)支原體感染發(fā)生率可達 63%,是細胞實驗失敗的常見誘因。本文從定義、理化特征、污染危害三方面科普支原體基礎(chǔ)知識點。
支原體是 1898 年被發(fā)現(xiàn)、無細胞壁、高度多形性的最小原核微生物,直徑僅 0.1~0.3μm,體型介于細菌與病毒之間,可生成絲狀、分枝狀結(jié)構(gòu),因此得名支原體。
核心物理特點:可穿透常規(guī) 0.22μm 除菌濾器,常規(guī)過濾無法去除;能在無生命人工培養(yǎng)基自主增殖,常溫環(huán)境附著操作臺、移液器表面可存活 4~6 天,環(huán)境耐受能力強。
細胞培養(yǎng) 95% 污染來自四大支原體:口腔支原體、精氨酸支原體、豬鼻支原體、萊氏無膽甾支原體(牛源性),不同菌種來源不同:口腔支原體多來自操作人員,豬鼻支原體來源于豬源胰酶,萊氏支原體、精氨酸支原體多潛伏在胎牛血清、新生牛血清內(nèi)。
1. 細胞生長異常:細胞增殖變慢、形態(tài)畸變,拉絲、鋪展變形,直接影響傳代與藥物篩選實驗;
2. 培養(yǎng)基無直觀變化:污染后培養(yǎng)液清澈不渾濁、不變色,肉眼無法快速分辨,多數(shù)細胞傳代多代后才發(fā)現(xiàn)污染;
3. 干擾實驗數(shù)據(jù):改變細胞代謝、基因表達,造成轉(zhuǎn)染、藥物實驗數(shù)據(jù)重復性差、結(jié)果失真;
4. 全實驗室交叉?zhèn)魅?/span>:支原體隨耗材、移液器擴散,造成整批細胞接連污染。
支原體無細胞壁、體型微小、環(huán)境耐受力強的生理特點,決定了它成為細胞培養(yǎng)頭號隱性污染源。弄懂支原體基礎(chǔ)屬性,是做好后續(xù)污染源排查、檢測與消殺的前提。
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