酵母單雜交與酵母雙雜交的區(qū)別：一文看懂Y1H和Y2H如何選擇

更新時間：2026-04-29

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酵母單雜交（Y1H）：檢測對象是DNA與蛋白質(zhì)的結(jié)合。它回答的問題是：“這個DNA序列能招募到哪個蛋白（通常是轉(zhuǎn)錄因子）？"

酵母雙雜交（Y2H）：檢測對象是蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的互作。它回答的問題是：“蛋白A能和蛋白B直接結(jié)合嗎？"

系統(tǒng)組件對比

對比項(xiàng)	酵母單雜交(Y1H)	酵母雙雜交(Y2H)
Bait成分	目標(biāo)DNA序列串聯(lián)報(bào)告基因	Gal4-BD融合蛋白(Bait蛋白)
Prey成分	AD融合待測蛋白（轉(zhuǎn)錄因子庫）	AD融合蛋白庫(Prey蛋白)
互作層級	DNA-蛋白結(jié)合后重組裝AD到報(bào)告基因上游	兩個蛋白結(jié)合后重組裝BD和AD成功能轉(zhuǎn)錄因子
典型應(yīng)用	鑒定調(diào)控元件的結(jié)合蛋白；繪制轉(zhuǎn)錄因子-DNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)	篩選互作蛋白伴侶；構(gòu)建蛋白互作網(wǎng)絡(luò)

如果你想找某段啟動子DNA上未知的結(jié)合蛋白，或者驗(yàn)證一個轉(zhuǎn)錄因子是否能與特定DNA基序結(jié)合，用Y1H。如果你想驗(yàn)證兩個已知蛋白是否存在直接物理互作，或是用誘餌蛋白去“釣"出未知的互作蛋白，用Y2H。

兩者在實(shí)驗(yàn)流程上也有差別：Y1H常常要構(gòu)建串聯(lián)重復(fù)的DNA誘餌菌株，Y2H則注重融合蛋白表達(dá)和毒性檢測。選對體系，事半功倍。

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